内容编辑细胞系鉴定
分类: 细胞鉴定
发布时间: 2015-04-28 22:17
人源细胞STR鉴定、小鼠细胞STR鉴定。据统计约30%细胞系被交叉污染或错误辨识,因使用了交叉污染或错误辨识的细胞而导致研究结论错误、结果不可重复、临床细胞治疗灾难性后果。这浪费大量时间、精力和金钱。因此NIH、ATCC等权威机构多次发出呼吁，要求研究者对细胞进行鉴定，如2011年美国专门颁布了细胞STR鉴定国家标准；2014年12月、2015年2月Science杂志分别发表文章专题阐述细胞交叉污染和错误辨识的严重性；2015年4月Nature通知：Nature旗下所有杂志将要求作者鉴定论文中所用细胞系；2015年6月即有报道称一科学家因用错细胞系，撤销Nature论文。
实验原理
STR（Short Tandem Repeat，短串联重复序列）基因位点由长度为3-7个碱基对的短串连重复序列组成，这些重复序列广泛存在于人类基因组中，可作为高度多态性标记，被称为细胞的DNA指纹，其可通过PCR（聚合酶链式反应）来检测。STR基因座位上的等位基因可通过扩增区域内重复序列的拷贝数的不同来区分，在毛细管电泳分离之后可通过荧光检测来识别。随后通过一定的计算方法，即可根据所得的STR分型结果与专业的细胞STR数据库比对从而推算出样品所属的细胞系或可能的交叉污染的细胞系名称。
何时需要鉴定
1. 发表文章或申请课题经费前；
2. 使用细胞进行临床治疗（试验）前；
3. 准备冻存保种或已冻存多年的细胞；
4. 一个涉及到细胞试验项目开始/结束时；
5. 新得到的细胞或实验室传5代以上的细胞；
6. 细胞系表现不稳定或结果与预期差别较大。
结果交付
1、提供20个特征位点特征峰图；
2、提供中英文细胞鉴定报告，可直接用于外文杂志投稿
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